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酵母单杂交技术是新近发展起来的一种体外研究DNA与蛋白质相互作用的技术。主要用途有①确定已知DNA—蛋白质之间是否存在相互作用;②分离结合于目的顺式调控元件或其他短DNA结合位点蛋白的新基因;③定位已经证实的具有相互作用的DNA结合蛋白的DNA结合结构域,以及准确定位与DNA结合的核苷酸序列。许多真核生物的转录激活子由物理和功能上独立的DNA结合区(DNA-binding domain BD)和转录激活区(Activation domain AD)组成,因此可构建各种基因与AD的融合表达载体,在酵母中表达为融合蛋白时,根据报道基因的表达情况,便能筛选出与靶元件有特异结合区域的蛋白。转录因子与顺式元件结合,激活最基本启动子,使得报告基因表达,若连接如3个以上顺式作用元件,可增强转录因子的识别和结合效率。
服务内容
• 酵母单杂载体构建
• 筛选顺式元件对AbA的抗性
• 验证顺式元件与转录因子的结合
• 酵母单杂文库构建
• 酵母单杂文库筛选并测序分析
• 阳性克隆验证
• 提供完整的实验图片以及报告单
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